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抗體是免疫系統(tǒng)的重要組成部分；  對抗感染和疾病以保護(hù)身體。  研究此類蛋白質(zhì)的基因組成在幾種不同的應(yīng)用中非常重要，包括抗體工程、數(shù)據(jù)庫、功能優(yōu)化和新抗體克隆的發(fā)現(xiàn)。

可以用稱為雜交瘤技術(shù)的方法對單克隆抗體進(jìn)行工程改造和選擇。 最初宿主動物被引入抗原 ，導(dǎo)致特定 B 細(xì)胞的產(chǎn)生。 幾周后，脾細(xì)胞被移除并與骨髓瘤細(xì)胞融合。

融合的細(xì)胞是永生的，經(jīng)過幾周的孵化，它們最終會產(chǎn)生抗體。  然而，一旦獲得這些抗體，就需要對其進(jìn)行篩選以確保特異性。  該篩選過程可以通過幾種測序技術(shù)進(jìn)行，如下所述。

用于鑒定的早期方法核酸抗體序列 之一是 Sanger 測序的小規(guī)模方法。 在 Sanger測序中，樣本 DNA 被分成四個小瓶，其中包含所有四種脫氧核苷酸和DNA聚合酶。

隨著 DNA 在每個小瓶中轉(zhuǎn)錄，然后添加修飾的標(biāo)記二脫氧核苷三磷酸 (ddNTP)，終止 DNA 延伸。  每個小瓶接收不同的 ddNTP，該 ddNTP會停止對不同核苷酸的測序。 然后可以通過電泳分離產(chǎn)生的片段，最終可以通過每個條帶的相對位置來識別 DNA 的序列。

該方法已用于抗體研究等多個行業(yè)，并已于 2003 年在人類基因組計(jì)劃中用于對第一個人類基因組進(jìn)行測序。但是，該方法受到限制，因?yàn)樗浅Ｂ?，需要大量的人工工作并且容易出錯。  因此，已經(jīng)開發(fā)了現(xiàn)代方法來提高測序的通量和可靠性。

現(xiàn)代的大規(guī)模測序技術(shù)

新一代測序技術(shù)是鑒定 DNA 核酸序列的現(xiàn)代方法。使用熒光標(biāo)記的 dNTP 可以更快地獲得結(jié)果，同時對數(shù)千個片段進(jìn)行測序。涉及四個主要階段：

●文庫制備 ：DNA 樣本被片段化，并在每一端添加接頭。

●簇?cái)U(kuò)增 ：片段與流動槽表面雜交并倍增。

●測序 ：將 試劑 添加到樣品中，然后開始測序。當(dāng)熒光標(biāo)記的抗體被摻入時，它們會釋放特定波長的發(fā)射。

●分析 ：通過生物信息學(xué)軟件從獲得的數(shù)據(jù)中推斷出DNA的序列。