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取點(diǎn)的時(shí)候?qū)?.2ml的槍頭前端剪去一點(diǎn)，用槍頭將凝膠戳取下來(lái)并轉(zhuǎn)移至0.5ml離心管中，用水將膠粒反復(fù)吸打沖洗兩至三次，最后吸干離心管中所有水分封蓋保存并做好標(biāo)記。離心管最好用進(jìn)口離心管，以免塑料污染；水最好用去離子水或者雙蒸水；取點(diǎn)的時(shí)候帶好口罩與手套，以免角蛋白污染。

iTRAQ是一級(jí)質(zhì)譜定性，二級(jí)質(zhì)譜定量，實(shí)際操作中，一級(jí)質(zhì)譜中m/z相近的一些母離子，而不是嚴(yán)格的同一m/z的母離子，被篩選進(jìn)入質(zhì)量分析器2進(jìn)行二級(jí)質(zhì)譜鑒定，定量的肽段與定性的肽段不是一一對(duì)應(yīng)的關(guān)系，故造成iTRAQ定量誤差大。然而，SILAC是一級(jí)質(zhì)譜定量，二級(jí)質(zhì)譜定性，定量的肽段就是對(duì)應(yīng)的定性的肽段，定量更加精確。

兩者都可用于差異較大的樣本（不同物種、不同組織部位），“有無(wú)”蛋白比較，不需要同位素標(biāo)記，成本相對(duì)低；樣本不受限制，應(yīng)用范圍廣。 label free確定是數(shù)據(jù)重復(fù)性稍差，缺失值較多。DIA非標(biāo)定量蛋白質(zhì)組學(xué)的重現(xiàn)性較高，所有離子信息都能采集，缺點(diǎn)是需要預(yù)先建立數(shù)據(jù)庫(kù)，數(shù)據(jù)分析較LFQ復(fù)雜。